简介
本试剂盒内含 1 根氨基酸分析专用柱和 5 组衍生化试剂。氨基酸分析专用柱为 130A 杂化硅胶颗粒 , 规格为 1.7µm 2.1*100mm。
每组衍生化试剂包括以下试剂各 1 瓶:AQC 衍生试剂(AQC reagent01):AQC 衍生试剂固体粉末,出厂时为干燥状态,以提升稳定性。 硼酸盐缓冲液(AQC reagent02):为样品衍生化提供合适的 pH 环境。
原理
氨基酸与 6- 氨基喹啉 -N- 羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC)反应,迅速生成高稳定性的脲,该衍生物能在荧光或紫外条件下进行分析,而过量的衍生化试剂则水解生成 6- 氨基喹啉(AMQ)、N- 羟基琥珀酰亚氨(NHS)和 CO2。
衍生化试剂复溶
打开前轻拍试剂瓶,使所有 AQC 试剂粉末落至瓶底,准确移取1mL 乙腈加入到试剂瓶中,充分混匀,直至粉末完全溶解(可加热促进溶解,加热温度 55℃,加热时间不超过 10min)。复溶后的衍生化试剂浓度为 10mM 的 AQC 乙腈溶液。
注意事项:
1 建议使用色谱纯乙腈。
2 AQC 试剂易与空气中水分发生作用,衍生化试剂须室温存放于干燥器中。
3 乙腈复溶后同样请将衍生化试剂密封并置于干燥器中(切勿冷藏),室温下可存放一周。
氨基酸衍生化操作流程
提前将加热装置预热到 55℃加入10 µL 标准品或样品(可置于玻璃衬管周末和)加入 70 µL 硼酸盐缓冲液,涡旋混匀 30s然后加入 20 µL AQC 衍生试剂,立即涡旋混匀 30s样品在室温下温育 1min,再转移到 55 ℃下加热样品 10 min样品冷却后,上机进行分析。
注意事项:
1 加热使酪氨酸的次要副产物转化为主要的单衍生化合物,室温转化速度较慢,半衰期约为 1h。
2 衍生反应需要在 pH 8.0-10.0 的环境下,如果盐酸水解样品需先除去过量盐酸。
3 衍生化试剂加入量不足或者部分失效会导致定量不准。氨基酸衍生产物在室温下储存至多一周,需密封保存并防止蒸发。
订货信息
货号 | 产品名称 | 规格 |
AN80A386 | Gemsil AQC柱前衍生氨基酸, HPLC方法包 | Gemsil AQC Kit+HPLC氨基酸专用柱, 1/KIT |
AN80A387 | Gemsil AQC柱前衍生氨基酸, UPLC方法包 | Gemsil AQC Kit+UPLC氨基酸专用柱, 1/KIT |
AN80A388 | Gemsil AQC柱前衍生试剂包 | Gemsil AQC Kit |
AN80A389 | Gemsil 氨基酸分析专用柱HPLC | Gemsil AAA HPLC, 3.5µm 4.6*150mm |
AN80A390 | Gemsil 氨基酸分析专用柱UPLC | Gemsil AAA UPLC, 1.7µm 2.1*100mm |